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<涨知识>如何选择HPLC检测器?

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HPLC检测器是高效液相色谱仪的关键部件之一,作用是将流出物的组成和含量变化转变为电信号,通过电子仪器测定,从而实现定性定量。常用的检测器包括紫外吸收检测器、示差折光检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器等等。不同检测器的工作原理不同,对不同的分析对象,响应也各不相同。接下来小编将从检测器的工作原理以及其在实际应用中的优缺点进行介绍,大家可根据具体分析对象,选择合适的检测器。

紫外吸收检测器

1. 工作原理
基于试样组分对特定波长紫外可见光的选择性吸收,组分浓度与吸光度成正比

2. 优点
① 灵敏度高,其最小检测量10-9g/mL;
② 线性范围宽;
③ 可用于梯度洗脱;
④ 波长可选,易于操作;
⑤ 可与任何检测器串联使用

3. 缺点
① 对紫外光完全不吸收的试样不能检测;
② 溶剂的选择受限制

示差折光检测器

1. 工作原理
基于连续测定流通池中试样组分和参比之间折射率的变化来确定样品含量

2. 优点
可检测绝大多数物质,特别适用于无紫外吸收的有机物(如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃)

3. 缺点
① 灵敏度低;
② 不能用于梯度洗脱

荧光检测器

1. 工作原理
基于样品中化合物或其衍生物经紫外光照射后,发射出荧光,荧光强度与样品浓度成正比

2. 优点
① 最小检测浓度可达0.1ng/mL,适用于痕量分析;
② 灵敏度比紫外检测器约高2个数量级

3. 缺点
① 线性范围不如紫外检测器宽;
② 只适用于检测能产生荧光的物质

蒸发光散射检测器

1. 工作原理
利用流动相与试样组分之间蒸汽压差,在流动相挥发除去的基础上,不挥发性组分粒子可以使激发光源中发出的光收到散射,并通过光电倍增管将散射光转变为电信号

2. 优点
① 任何挥发性低于流动相的样品均能被检测;
② 灵敏度比示差折光检测器高;
③ 对温度变化不敏感,基线稳定,适合与梯度洗脱液相色谱联用

3. 缺点
① ELSD不适合测定可挥发和半挥发性化合物;
② 流动相必须是可挥发的

电化学检测器

1. 工作原理
基于样品中电化学活性组分流经电极表面时,电极材料与组分之间存在一定电位差,从而发生氧化还原反应

2. 优点
① 灵敏度高,最小检测量一般为ng级,有的可达pg级;
② 选择性好,可测定大量非电化学活性物质中极痕量的电化学活性物质;
③ 线性范围宽,一般为4~5个数量级;
④ 设备简单,成本较低;
⑤ 易于自动操作

3. 缺点
① 干扰比较多,样品或流动相中的杂质及温度的变化都会对其产生影响;
② 电极寿命有限,对温度和流速的变化比较敏感

化学发光检测器

1. 工作原理
基于试样组分与适当的化学发光试剂发生化学反应,导致发光物质产生辐射,其光强度与试样组分的浓度成正比

2. 优点
① 灵敏度高;
② 选择性好,仅对被测组分有响应;
③ 样品可直接分析,不需要前处理

3. 缺点
① 价格相对较高;
② 使用的反应气或化学发光反应产物经常是危险性的气体

质谱检测器

1. 工作原理
试样组分在离子源中发生电离,形成带正电荷的离子,经加速电场形成离子束,再在电场和磁场的作用下,按照各自质荷比大小依次记录成谱

2. 优点
① 分离效率高;
② 适用范围广;
③ 稳定性好;
④ 能同时获取组分的结构信息

3. 缺点
① 响应信号受离子化效率限制;
② 与其他检测器相比,使用和维护费用较高;
③ 流动相只能选择易挥发的组分

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