Preclinical
SEARCH
Home > 检测服务 > 生化检测 > 糖酵解类
百泰派克

糖酵解类

葡萄糖或糖原在无氧或缺氧条件下,分解为乳酸同时产生少量ATP的过程,由于此过程与酵母菌使糖生醇发酵的过程基本相似,故称为糖酵解。催化糖酵解反应的一系列酶存在细胞质中,因此糖酵解全部反应过程均在细胞质中进行。糖酵解是所有生物体进行葡萄糖分解代谢所必须经过的共同阶段。

检测方法

百泰派克检测平台使用酶法测定糖酵解过程中的中间产物如果糖-1, 6-二磷酸,对于在糖酵解过程中的酶类物质,采用相应的试剂盒采用生化法检测。可检测的物质包括己糖激酶、磷酸果糖激酶、果糖-1, 6-二磷酸、丙酮酸激酶等。

两种酶法测定糖酵解类物质结果比较
两种酶法测定糖酵解类物质结果比较


样品制备

糖酵解代谢物提取方法(此部分涉及到公司的核心工艺,以下提供常规的提取工艺)

1) 取1 mL的血浆样品;
2) 加入 1 mL 30%的高氯酸;
3) 超声震荡5 min;
4) 3000 rpm离心10 min;
5) 取上清,加入4 M 0.1 mL的K2CO3;
6) 静置10 min,3000 rpm离心10 min;
7) 酶法检测。

糖酵解类检测服务列表

可测物质 周期
果糖-1, 6-二磷酸(FDP) 2-3
己糖激酶(HK) 2-3
丙酮酸激酶(PK) 2-3
磷酸果糖激酶(PFK) 2-3
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 2-3
其他糖酵解类物质 请联系技术支持181-0124-5990

果糖-1,6-二磷酸(FDP)含量检测

测定意义:果糖-1,6-二磷酸,又称1,6-二磷酸果糖,是糖酵解途径的重要中间产物之一,在临床上,主要用作治疗心脏缺血症的辅助药物。

测定原理:果糖1,6-二磷酸在醛缩酶催化下发生降解,产物与DNPH反应生成紫红色化合物,在540nm处有最大吸收峰,可利用分光光度法检测果糖-1,6-二磷酸含量。

己糖激酶(HK)活性检测

测定意义:己糖激酶是催化己糖磷酸化的酶,参与植物信号转导过程,可调控糖降解和氧化磷酸化途径的代谢速率。

测定原理:己糖激酶催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm处有最大吸收峰,可利用分光光度法检测己糖激酶活性。

丙酮酸激酶(PK)活性检测

测定意义:丙酮酸激酶,又称磷酸丙酮酸激酶、丙酮酸磷转称酶,是一种转移酶,主要参与糖酵解途径和遗传物质代谢的调控,是糖酵解途径的3个关键酶之一。

测定原理:丙酮酸激酶催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成丙酮酸和ATP,乳酸脱氢酶催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,可通过计算340nm处NADH的减少量检测丙酮酸激酶活性。

磷酸果糖激酶(PFK)活性检测

测定意义:磷酸果糖激酶是一种变构酶,催化糖酵解途径中第一个不可逆反应,是糖酵解途径中的关键酶之一。

测定原理:磷酸果糖激酶催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶依次催化NADH氧化生成NAD+,可通过计算340nm处NADH的减少量检测磷酸果糖激酶活性。

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性检测

测定意义:磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶是植物细胞代谢中的一种重要的羧化酶,参与植物光合碳同化以及植物种子和果实的营养物质合成与代谢,也是C4二羧酸循环和景天酸代谢途径的关键酶。

测定原理:磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化磷酸烯醇式丙酮酸生成草酰乙酸,苹果酸脱氢酶催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,可通过计算340nm处NADH的减少量检测磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性。

百泰派克定位图标 地址:
北京市大兴区亦庄经济开发区科创六街88号 E3-602
百泰派克邮箱图标 邮箱:
info@biotech-pack-analytical.com
百泰派克电话图标 电话:
010-58222780
181-0124-5990