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辅酶类

辅酶是一小有机非蛋白分子,其用途为在酵素(酶)内载运化学基。许多辅酶是磷化水溶性维他命。但非维他命物质也可能是辅酶,如ATP-磷酸基的生化载具。在细胞内,反应后的辅酶可以被再生,以维持其胞内浓度在一个稳定的水平上。由于辅酶的再生对于维持酶反应体硫胺素系的稳定是必要的,因此,辅酶再生系统在实验室以及工业中具有广泛应用。

辅酶

辅酶


迪信泰检测平台采用生化的方法检测辅酶类物质,使用相应的酶类的试剂盒可以高效、精准的检测辅酶类物质的活性变化。目前可检测的辅酶类物质包括NADH、NADPH、乳酸脱氢酶、乙醛脱氢酶、柠檬酸合酶和丙酮酸脱羧酶等。此外,迪信泰检测平台还提供HPLC法测定辅酶类物质的服务以满足您的不同需求。

pH值对丙酮酸脱羧酶活性的影响


pH值对丙酮酸脱羧酶活性的影响

迪信泰检测平台可测定辅酶类项目

NADH氧化酶((NOX))活性检测
测定意义:NADH氧化酶可催化NADH氧化生成NAD+,在调控微生物代谢方面具有重要意义。同时,NADH氧化酶也是细胞中一种重要的氧代谢酶,在清除胞内氧毒性和维持胞内氧平衡方面具有重要作用。
测定原理:NADH氧化酶能催化NADH氧化生成NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,将蓝色的DCPIP还原为无色的DCPIP,蓝色的DCPIP在600nm处有最大吸收峰,可通过计算蓝色DCPIP的还原速率检测NADH氧化酶活性。

乳酸脱氢酶((LDH))活性检测
测定意义:乳酸脱氢酶是糖代谢酵解途径的关键酶之一,广泛存在于动物、植物及微生物中,乳酸脱氢酶有6种同工酶,其分布具有明显的组织特异性,可协助临床上心肌疾病的诊断。
测定原理:乳酸脱氢酶能催化乳酸生成丙酮酸和NADH,NADH在340nm处有最大吸收峰,可利用比色法检测乳酸脱氢酶活性。

6-磷酸葡萄糖脱氢酶((G6PDH))活性检测
测定意义:6-磷酸葡萄糖脱氢酶是催化磷酸戊糖途径第一步反应的关键酶,催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH。
测定原理:6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化NADP+还原为NADPH,在340 nm处有最大吸收峰,可利用比色法检测6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性。

NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH) 活性检测
测定意义:苹果酸脱氢酶是一种氧化还原酶,主要参与TCA循环、C4循环和光合作用等代谢途径。按不同的辅酶特异性,苹果酸脱氢酶可分为NAD-依赖性的苹果酸脱氢酶和NADP-依赖性的苹果酸脱氢酶。NAD-依赖性的苹果酸脱氢酶广泛存在于所有真核细胞的细胞质和线粒体中,其中,线粒体中的苹果酸脱氢酶是TCA循环的关键酶之一。
测定原理:NAD-苹果酸脱氢酶/NADP-苹果酸脱氢酶分别催化NADH/ NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,NADH在340nm处有最大吸收峰,可通过计算NADH减少速率检测NAD-苹果酸脱氢酶活性。

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测
测定意义:苹果酸脱氢酶是一种氧化还原酶,主要参与TCA循环、C4循环和光合作用等代谢途径。按不同的辅酶特异性,苹果酸脱氢酶可分为NAD-依赖性的苹果酸脱氢酶和NADP-依赖性的苹果酸脱氢酶。NAD-依赖性的苹果酸脱氢酶广泛存在于所有真核细胞的细胞质和线粒体中,其中,线粒体中的苹果酸脱氢酶是TCA循环的关键酶之一。
测定原理:NAD-苹果酸脱氢酶/NADP-苹果酸脱氢酶分别催化NADH/ NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,NADH在340nm处有最大吸收峰,可通过计算NADH减少速率检测NAD-苹果酸脱氢酶活性。

乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测
测定意义:乙醛脱氢酶属于胞内酶之一,线粒体中的乙醛脱氢酶对乙醛的代谢具有重要作用,可以防止乙醛对膜的脂质过氧化。同时,乙醛脱氢酶还对氧化刺激导致的神经细胞、内皮细胞的损伤具有拮抗作用。
测定原理:在辅酶Ⅰ存在的条件下,乙醛脱氢酶能催化乙醛和NAD+生成乙酸和NADH,NADH在340nm处有最大吸收峰,可通过计算NADH的生成速率检测乙醛脱氢酶的活性。

硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)活性检测
测定意义:硫氧还蛋白氧化还原酶是一种吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶,具有调节细胞生长和机体氧化还原等多种生物学活性,而且与肿瘤、遗传性疾病、自身免疫性疾病等多种人类疾病的发生、发展有关。
测定原理:硫氧还蛋白氧化还原酶催化NADPH还原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm处有最大吸收峰,可通过计算TNB的生成速率检测硫氧还蛋白氧化还原酶活性。

NAD激酶(NADK)活性检测
测定意义:NAD激酶是一类别构酶,活性受NAD、NADP的调节及NADH和NADPH的竞争性抑制。NADK可能存在有氧化态和还原态两种存在形式。
测定原理:NADK催化NAD+磷酸化,生成的NADP+被还原为NADPH;NADPH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝,氧化型噻唑蓝在600 nm处有最大吸收峰,可通过计算MTT的还原速率检测NAD激酶活性。

柠檬酸合酶(CS)活性检测
测定意义:柠檬酸合酶是植物多种代谢途径的限速酶,主要存在于线粒体基质中。
测定原理:柠檬酸合酶催化乙酰辅酶A和草酰乙酸生成柠檬酰辅酶A,进一步水解为柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在412nm处有最大吸收峰,可利用分光光度法检测柠檬酸合酶活性。

丙酮酸脱羧酶(PDC)活性检测
测定意义:丙酮酸脱羧酶是一种广泛存在于植物和微生物体内的羧化酶,也是乙醇合成的关键酶。
测定原理:丙酮酸脱羧酶以丙酮酸为底物催化NADH氧化生成NAD+,NADH在340nm处有最大吸收峰,可通过计算NADH的减少量检测丙酮酸脱羧酶活性。

醇脱氢酶(ADH)活性检测
测定意义:醇脱氢酶是存在于动物、植物和微生物体内的含锌金属酶,,主要催化生物体内伯醇的氧化和醛的还原,在医学分析中可作为诊断肝细胞坏死的特异性指标;在工业生产中可作为催化剂用于生产原料及中间产物。
测定原理:醇脱氢酶催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+,NADH在340nm处有最大吸收峰,可通过计算NADH的减少量检测醇脱氢酶活性。

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)活性检测
测定意义:异柠檬酸脱氢酶是一种具有脱羧作用的氧化还原酶,按不同的分布部位,可分为线粒体异柠檬酸脱氢酶和胞浆异柠檬酸脱氢酶。线粒体异柠檬酸脱氢酶以NAD+为辅酶,主要参与TCA循环途径;胞浆异柠檬酸脱氢酶以NADP+为辅酶,与人体某些疾病的发生密切相关。
测定原理:胞浆异柠檬酸脱氢酶催化NADP+还原生成NADPH,在340 nm处有最大吸收峰,可利用分光光度法检测胞浆异柠檬酸脱氢酶活性。

NADP磷酸酶(NADPase)活性检测
测定意义:NADP磷酸酶是目前已知的唯一催化NADP+水解生成NAD+的酶,与NAD激酶共同调控NAD(H)和NADP(H)相对水平。
测定原理:NADP磷酸酶催化NADP+水解生成NAD+和无机磷,可通过计算无机磷在660nm处的生成量检测NADP磷酸酶活性。

NADP-苹果酸酶(NADP-ME)活性检测
测定意义:按不同的辅酶因子,苹果酸酶可分为NAD-苹果酸酶和NADP-苹果酸酶两种,分别存在于植物细胞的质体和细胞质中。NAD-苹果酸酶和NADP-苹果酸酶都是C4途径的关键酶,催化苹果酸脱羧生成丙酮酸,丙酮酸进一步转化为烯醇式丙酮酸磷酸,保证C4途径循环进行。
测定原理:NAD-苹果酸酶/NADP-苹果酸酶催化NAD+/NADP+还原成NADH/NADPH,可通过计算340nm处NADH/NADPH增加速率检测NAD-苹果酸酶/NADP-苹果酸酶活性。

NAD-苹果酸酶(NAD-ME) 活性检测
测定意义:按不同的辅酶因子,苹果酸酶可分为NAD-苹果酸酶和NADP-苹果酸酶两种,分别存在于植物细胞的质体和细胞质中。NAD-苹果酸酶和NADP-苹果酸酶都是C4途径的关键酶,催化苹果酸脱羧生成丙酮酸,丙酮酸进一步转化为烯醇式丙酮酸磷酸,保证C4途径循环进行。
测定原理:NAD-苹果酸酶/NADP-苹果酸酶催化NAD+/NADP+还原成NADH/NADPH,可通过计算340nm处NADH/NADPH增加速率检测NAD-苹果酸酶/NADP-苹果酸酶活性。

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)活性检测
测定意义:6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶是磷酸戊糖途径的关键酶之一,在植物生长发育和胁迫应答中发挥重要作用。
测定原理:6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶催化NADP+还原生成NADPH,可通过计算340nm处NADPH生成量检测6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶活性。

肌酸激酶(CK)活性检测
测定意义:肌酸激酶,又称肌酸磷酸激酶,主要存在于心肌、骨骼肌和平滑肌中,参与线粒体呼吸、肌肉收缩供能和糖酵解的控制,是ATP-CP功能系统代谢的关键酶。
测定原理:肌酸激酶催化磷酸肌酸与ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖生成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,可通过计算340nm处NADPH生成量间接检测肌酸激酶活性。

脂肪酸合成酶(FAS)活性检测
测定意义:脂肪酸合成酶是高等动物内源性长链脂肪酸合成的关键酶,分布在细胞胞浆内,在治疗肥胖症方面具有重要作用。
测定原理:脂肪酸合成酶催化NADPH氧化乙酰CoA和丙二酸单酰CoA生成脂肪酸,可通过计算340nm处NADPH的减少量检测脂肪酸合成酶活性。

NADH含量检测
测定意义:NADH,即还原性辅酶I,主要由糖酵解和呼吸作用TCA循环中产生,是呼吸作用过程中必不可少的一种酶类,可用于监测线粒体的功能。
测定原理:NADH氧化生成NAD+,可通过计算340nm处NADH的减少量检测NADH含量。

NADPH含量检测
测定意义:NADPH,即还原型辅酶II,,主要由光合作用的光反应阶段产生,在生物体内通常作为电子供体,是很多氧化还原酶的辅酶。
测定原理:NADPH通过PMS传递氢,将氧化型噻唑蓝还原为甲瓒,在570nm处有最大吸收峰,可通过分光光度法检测NADPH含量。

生化法测定辅酶类样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL,测定样品不返还,请您保留备份。

周期:2~3周

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关参数(中英文)
3. 图片
4. 原始数据
5. 辅酶类酶活性信息

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体请咨询技术支持181-0124-5990

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