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氧化磷酸化类

氧化磷酸化是物质在体内氧化时释放的能量通过呼吸链供给ADP与无机磷合成ATP的偶联反应。氧化磷酸化作用是指有机物包括糖、脂、氨基酸等在分解过程中的氧化步骤所释放的能量,驱动ATP合成的过程。在真核细胞中,氧化磷酸化作用在线粒体中发生,参与氧化及磷酸化的体系以复合体的形式分布在线粒体的内膜上,构成呼吸链,也称电子传递链。

检测方法

百泰派克检测平台采用生化的方法检测氧化磷酸化系列物质,结合相应的酶类的试剂盒,可高效、精准的检测氧化磷酸化类物质酶的活性变化。目前可检测的物质包括Na+k+——ATP酶、Ca++Mg++——ATP酶、线粒体呼吸链复合体Ⅰ、线粒体呼吸链复合体Ⅳ等。

线粒体呼吸链复合体活性
线粒体呼吸链复合体活性


氧化磷酸化系列检测服务列表

可测物质 周期
Na+k+—ATP酶 2-3
Ca++Mg++—ATP酶 2-3
ATP含量 2-3
线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性 2-3
线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性 2-3
线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性 2-3
线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性 2-3
线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性 2-3
其他氧化磷酸化类物质 请联系技术支持181-0124-5990

Na+k+ ——ATP酶活性检测

测定意义:Na+k+ ——ATP酶是一种广泛存在于生物体细胞膜上的重要酶,在维持细胞正常生理功能中具有重要作用,可催化ATP水解为机体提供能量,也可调节细胞渗透压、维持细胞膜两侧的膜电位。

测定原理:Na+k+ ——ATP酶能催化ATP水解生成ATP和无机磷,可通过检测无机磷的含量间接得出Na+k+ ——ATP酶活性。

Ca++Mg++ ——ATP酶活性检测

测定意义:Ca++Mg++ ——ATP酶是另一种广泛存在于生物体细胞膜上的重要酶,可催化ATP水解,也可维持细胞内Ca+和Mg+浓度稳定。

测定原理:Ca++Mg++ ——ATP酶能催化ATP水解生成ATP和无机磷,可通过检测无机磷的含量间接得出Ca++Mg++ ——ATP酶活性。

ATP含量检测

测定意义:ATP是细胞内的一种高能磷酸化合物,主要来源于动物、人、真菌和大多数细菌的呼吸作用。ATP是细胞生命活动所需能量的直接来源,但并非唯一来源,其他核苷的三磷酸酯也可以直接为生命活动提供能量。

测定原理:ATP在254nm处有最大吸收峰,可利用高效液相色谱(HPLC)检测ATP含量。

线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性检测

测定意义:线粒体呼吸链复合体Ⅰ,又称为NADH-辅酶Q还原酶,是呼吸链电子传递过程的限速酶,也是线粒体内活性氧产生的主要位点之一,主要分布于生物体线粒体内膜中。

测定原理:线粒体呼吸链复合体Ⅰ,又称为NADH脱氢酶,可催化NADH脱氢生成NAD+,在340nm处检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性。

线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性检测

测定意义:线粒体呼吸链复合体Ⅱ,又称为琥珀酸-辅酶Q还原酶,是电子传递链的重要组成部分,主要分布于线粒体内膜上,其活性可直接或间接地反映线粒体的呼吸功能。

测定原理:线粒体呼吸链复合体Ⅱ催化琥珀酸最终生成还原型辅酶Q,还原型辅酶Q能与2,6-二氯吲哚酚发生氧化还原反应,2,6-二氯吲哚酚在605nm处有最大吸收峰,可利用分光光度法/微量法检测线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性。

线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性检测

测定意义:线粒体呼吸链复合体Ⅲ,又称为辅酶Q-细胞色素C还原酶,是电子传递链的重要组成部分,也是线粒体内活性氧产生的主要位点之一,主要分布于线粒体内膜上。

测定原理:线粒体呼吸链复合体Ⅲ催化生成还原型细胞色素C,其在550nm处有最大吸收峰,可利用分光光度法/微量法检测线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性。

线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性检测

测定意义:线粒体呼吸链复合体Ⅳ,又称为细胞色素C氧化酶,是呼吸链电子传递的终端电子受体,主要分布于线粒体内膜上。

测定原理:线粒体呼吸链复合体Ⅳ催化还原型细胞色素C氧化,还原型细胞色素C在550nm处有最大吸收峰,可利用分光光度法/微量法检测线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性。

线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性检测

测定意义:线粒体呼吸链复合体Ⅴ,又称为ATP合成酶,是氧化磷酸化过程中合成ATP的关键酶,分布于线粒体和叶绿体中,与以下4种复合体一起完成氧化磷酸化。

测定原理:线粒体呼吸链复合体Ⅴ催化ATP水解生成ADP和Pi,可利用分光光度法/微量法检测线粒体呼吸链复合体V活性。

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