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蛋白含量

蛋白质是由氨基酸以“脱水缩合”的方式组成的多肽链经过盘曲折叠形成的具有一定空间结构的物质。蛋白质是由α-氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链,再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合而成的高分子化合物。蛋白质就是构成人体组织器官的支架和主要物质,在人体生命活动中,起着重要作用,可以说没有蛋白质就没有生命活动的存在。

检测方法

百泰派克检测平台采用蛋白含量测试盒的方法对蛋白含量进行测定,方法如下:

蛋白含量检测方法
蛋白含量检测方法
考马斯亮蓝G-250及其蛋白反应液吸收光谱扫描图
考马斯亮蓝G-250及其蛋白反应液吸收光谱扫描图


样品制备

细胞样品处理方法:

1) 收集细胞;
2) 用磷酸缓冲液洗细胞3次;
3) 加入裂解缓冲液,室温振荡1 h,使其充分溶解;
4) 4℃,40000g,离心1 h;
5) 生化法检测蛋白含量。

植物组织样品处理方法:

1) 液氮研磨;
2) 植物组织悬浮于10%三氯醋酸和0.07% β-巯基乙醇的丙酮溶液在-20℃冰浴;
3) 沉淀过夜离心,弃上清;
4) 重悬沉淀于含0.07% β-巯基乙醇的冰预冷丙酮溶液;
5) 离心后真空干燥沉淀;
6) 裂解离心;
7) 生化法检测蛋白含量。

动物组织样品处理方法:

1) 液氮研磨,每1 g样品加入0.5 mL裂解液;
2) 组织匀浆器匀浆30 s;
3) 组织悬液15℃,10000 g离心10 min;
4) 上清液4℃,150000g超速离心45℃;
5) 避开上层漂浮的脂质层,吸取离心上清6℃,40000g,离心50 min;
6) 生化法检测蛋白含量。

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